Zymo 質(zhì)粒中提/大提試劑盒通過(guò)利用離心柱或微珠的特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)和相應(yīng)緩沖液的針對(duì)性作用,實(shí)現(xiàn)了對(duì)質(zhì)粒DNA的高效提取。其原理主要包括裂解細(xì)胞、選擇性結(jié)合質(zhì)粒DNA、洗滌去除雜質(zhì)、解吸質(zhì)粒DNA和純化質(zhì)粒DNA這幾個(gè)步驟。通過(guò)這些步驟的組合,可以獲得高純度的質(zhì)粒DNA樣品,適用于各種分子生物學(xué)應(yīng)用,如限制酶切、PCR擴(kuò)增和測(cè)序等。
Zymo 質(zhì)粒中提/大提試劑盒的使用方法及應(yīng)用:
1.培養(yǎng)細(xì)菌:將細(xì)菌菌株接種到含有相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基上,并在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下培養(yǎng)細(xì)菌,直至達(dá)到適當(dāng)?shù)募?xì)菌密度。
2.收集細(xì)菌:將培養(yǎng)的細(xì)菌轉(zhuǎn)移到離心管中,并進(jìn)行離心,以沉淀細(xì)菌細(xì)胞。
3.細(xì)菌溶解:將離心后的細(xì)菌細(xì)胞重懸于溶解緩沖液中,溫和地震蕩管,使細(xì)菌細(xì)胞溶解。
4.蛋白質(zhì)沉淀:加入蛋白質(zhì)沉淀試劑,混勻后離心,將上清液倒掉,留下蛋白質(zhì)沉淀。
5.提取DNA:將DNA結(jié)合柱放置于收集管中,將上述蛋白質(zhì)沉淀溶液加入DNA結(jié)合柱中,并進(jìn)行離心。然后將DNA結(jié)合柱轉(zhuǎn)移到新的收集管中。
6.洗滌DNA:將洗滌緩沖液1加入DNA結(jié)合柱中,離心,將上清液倒掉,重復(fù)此步驟一次。然后加入洗滌緩沖液2,離心,并將上清液倒掉。
7.質(zhì)粒DNA重溶:將DNA結(jié)合柱轉(zhuǎn)移到含有洗滌緩沖液3的管中,并在常溫下孵育片刻,通過(guò)離心將DNA從DNA結(jié)合柱上還原到收集管中。
Zymo 質(zhì)粒中提/大提試劑盒的維護(hù)保養(yǎng)建議:
1.儲(chǔ)存溫度:應(yīng)儲(chǔ)存在溫度范圍內(nèi)。根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū),通常應(yīng)在-20℃保存。確保在儲(chǔ)存期間處于恒定的低溫環(huán)境中,避免反復(fù)凍融。
2.保持干燥:中的某些組分對(duì)潮濕敏感,因此應(yīng)避免受潮。在使用前,請(qǐng)確保所有試劑瓶蓋都緊閉,并將其放在干燥的地方。
3.避免污染:使用時(shí)需注意操作的嚴(yán)格無(wú)菌條件以避免污染。使用無(wú)菌技術(shù)和工具,并確保所有操作臺(tái)和工作區(qū)都經(jīng)過(guò)清潔消毒。
4.注意過(guò)期日期:檢查上的過(guò)期日期。過(guò)期的試劑可能會(huì)導(dǎo)致性能下降或失敗,因此請(qǐng)勿使用過(guò)期的試劑。
5.適當(dāng)保存剩余試劑:當(dāng)使用完所需的試劑量后,可以將剩余的試劑保存在特定的條件下供以后使用。請(qǐng)根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上的建議保存任何剩余的試劑,并確保它們不會(huì)受到污染。
6.按照說(shuō)明書(shū)操作:在使用Zymo質(zhì)粒提/大提試劑盒時(shí),務(wù)必按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上的指導(dǎo)進(jìn)行操作。嚴(yán)格遵循說(shuō)明書(shū)中的步驟和注意事項(xiàng),以確保結(jié)果。
7.建議參照其他相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室維護(hù)保養(yǎng)指南:在使用之前,建議充分閱讀其他實(shí)驗(yàn)室維護(hù)保養(yǎng)指南。